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假性狂犬病(pseudorabies; Pr)係由屬於包疹病毒(herpesvirus)的假性
狂犬病病毒(pseudorabies virus; PrV)所引起的疾病，成豬常為不顯性
感染，死亡率低，懷孕母豬常有流產、死產及延遲分娩等現象，哺乳仔豬
及離乳幼豬症狀最嚴重，嚴重威脅到養豬事業的經濟利益。傳統上預防Pr
仍仰賴死毒疫苗，除了生產成本高之缺點外，經注射後無法有效地刺激細
胞性免疫反應，且產生之抗體無法區分是因注射疫苗或感染野外毒株，換
言之，即不能配合執行撲殺抗體陽性豬之清除計畫。本論文之目的即在利
用重組DNA技術，發展出安全和有效的Pr新疫苗。Pr病病毒的結構性醣蛋
白(structural glycoprotein) 與單純性包疹病毒( herpes simplex
virus; HSV)有很高的相似性，其中已知gI(gE)對Pr病毒本身的增殖並不
是必須的，因此我們選擇gI基因缺損株作為疫苗的標記( marker)，加上
油質佐劑製成不活化疫苗，證明其效力與傳統的油質疫苗相同，但可以利
用免疫效素吸附試驗(ELISA),檢測gI抗體的產生與否，作為野外感染與疫
苗免疫的區分指標。進一步選擇缺gI醣蛋白及缺胸腺核甘激脢(thymidine
kinase; TK)之 Pr雙基因缺損株(PR-gI-/TK-)，開發成活毒疫苗。免疫小
白鼠及豬隻，可產生中和抗體，刺激脾臟淋巴細胞增殖反應及耐過Pr強毒
攻擊，證實是安全而有效的活毒疫苗。由於活毒疫苗與死毒疫苗注射至體
內，是經由不同的抗原呈現方式去刺激免疫細胞，因此，我們設計了涵蓋
兩者的不同免疫方式，結果發現混合使用效果的確較佳。更進一步要探討
的是新的免疫方式，即利用基因槍的原理(gene-gun- mediated)，將DNA
直接送入動物體內較易接受抗原的免疫活躍區如表皮層 (epidermis)。此
種免疫方法具有模擬弱毒化的活毒疫苗，可經由體內的抗原呈現方式，呈
現給MHC class I，進而產生刺激細胞免疫反應的優點，但卻無使用可能
具有傳染性因子之缺點。gp50(gD)是參與Pr病毒吸附到宿主細胞表面，進
而進入宿主細胞的重要醣蛋白，也是刺激中和抗體產生的重要抗原區。因
此，我們選用可表現gp50 的質體，利用粒子砲轟法( partical
bombadment)及細菌遞送法(bacterial delivery system)二種方式將gp50
送入BALB/c BYJ 的小白鼠內。結果發現，免疫後可刺激抗體的產生，淋
巴細胞的增殖反應及毒殺性T 細胞的毒殺作用，証實了Pr-gp5 DNA疫苗有
其發展潛力。
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