Toll-Like Receptor 9 Signaling Activates NF-κB through IFN Regulatory Factor-8 (IRF 8) / IFN Consensus Sequence Binding Protein (ICSBP) in Dendritic Cells

J Immunol. 2004 Jun 1;172(11):6820-7.

Speaker：曾昭穎

寡去氧核糖核酸(ODN)含有CpG motif可引起宿主防禦機制啟動而引起免疫反應。而辨識CpG motif的受體為Toll-like receptor (TLR) 9，活化此受體後進一步會引起一連串的細胞訊息傳遞反應，其中包含了mitogen activated protein kinase (MAPKs)，和 p38。CpG也會引起B細胞增殖反應，促使B細胞產生了一些發炎的細胞激素，如TNF-α、IL-6、IL-10，且也跟著活化單核球/巨噬細胞，和樹突細胞，進而分泌大量的細胞激素，而其反應也使得一些輔助刺激因子大量表現 ( CD40、CD80、CD86 ) 。Interferon consensus sequence binding protein ( ICSBP；也稱 Interferon regulatory factor 8 [IRF-8] )，它為IRF家族成員中的一員，是一種特殊的DNA轉錄因子，而在先前的研究中，已證明IRF-8在淋巴系和骨髓系的樹突細胞 (DC) 發育過程中，對於在DCs發展成為plasmacytoid DCs (pDC)和CD8α^-是必須的調控因子。

在本篇論文中，作者證明了：IRF-8 -/-DCs在給予CpG刺激後是不反應的，而且也無法引發TNF-α和IL-6的分泌。而在給予CpG刺激後的IRF-8 -/-DCs，NF-κB也無法被活化起來，但相對於給予LPS刺激後，則可產生強烈的反應，這些現象意味著，在IRF-8 -/-DCs之Toll-like receptor (TLR) 9的訊息傳遞路徑被選擇性的阻礙了。而在本篇論文結果中，也看出在IRF-8 -/-DCs給予CpG刺激後，也無法活化IKKαβ，且作者也在之後的研究中發現，額外在IRF-8 -/-DCs送入正常的IRF-8基因後，則給予CpG刺激之後，則看到了NF-κB被活化起來，顯示出在Toll-like receptor (TLR) 9的訊息傳遞路徑可正常的進行，並且也產生了一些發炎的細胞激素。因此，IRF-8在調控DCs 的NF-κB活化在先天性和應變性免疫中扮演了重要的角色。

實驗設計流程

1.是否在IRF-8 -/- DCs給予CpG刺激後能夠引發細胞激素的產生和NF-κB的活

化 ?

2.是否在IRF-8 -/- DCs給予CpG刺激後能夠磷酸化IKK和p38 mitogen-activated

protein kinase (MAPK) ?

3.是否在IRF-8 -/- DCs送入一個正常的IRF-8基因後，會再給予CpG刺激後能夠再度產生細胞激素和活化NF-κB ?