微生物及免疫學研究所專題討論中文報告

碩二 S46934031 陳銘祥

Listeria hijacks the clathrin-dependent endocytic machinery to invade mammalian cells

Esteban Veiga and Pascale Cossart

Nature Cell Biology 7: 894-900

引言：

微生物在感染宿主的過程中會利用不同的機制來抵抗宿主的免疫反應，而細胞內寄生的細菌，便利用躲入細胞中來逃避免疫反應的攻擊。Listeria monocytogenes可以侵入吞噬細胞以及非吞噬細胞中，已知的L. monocytogenes所具有的invasins包括inlA, inlB，其中inlB已知可以辨認細胞上hepatocyte growth factor receptor, Met，而侵入的機制作者推測可能與細胞的內吞作用 (endocytosis) 相關本篇作者首先利用純化的inlB protein來是否在inlB存在的情形下，可以使Met進行Ubiquitination的酵素(Cbl)聚集到receptor來,近ㄧ步在利用免疫螢光染色以及顯微鏡的觀察，作者的確發現在L. monocyto- genes感染細胞時，侵入的位置與Met receptor、EEA-1、Cbl、clathrin、dynamin這些與細胞內吞作用相關的蛋白質有相關；而當過度或是降低細胞內Cbl酵素表現都會影響到細菌入侵細胞的能力，並且當作者利用RNAi的方式降低ㄧ些與內吞作用相關的基因表現，的確可以看到細菌的入侵受到影響，而可以看到在L. monocytogenes藉由搶奪宿主內吞作用的機制，來達到入侵細胞的目的。

實驗結果:

ㄧ、InlB 可以促使Met receptor產生monoubiqutination 以及內吞作用:

作者利用純化的inlB處理細胞，藉此觀察Met變化，的確發現存在inlB的情形下，增加Met被monoubiquitination的程度，已確定Met與inlB之間的關連性。

二、Met在L.monocytogenes感染時所分布的位置:

三、Ubiqutination 的重要酵素Cbl在細菌進入細胞時所扮演的角色:

四、與內吞作用相關的分子在Listeria進入細胞時有colocalization現象:

五、作者進ㄧ步利用RNAi的方式，降低與內吞作用有關蛋白的表現，的確發現可以抑制L.monocytogenes的感染：

結論:

本篇作者發現，L. monocytogenes可以藉由inlB與細胞表面上的Met receptor 結合，造成Met receptor 活化、進ㄧ步進行內吞作用，藉著這些與內吞作用相關蛋白質的幫助，細菌便進入細胞中，也許從前對於內吞作用僅限於一些小分子的觀念，因為本篇實驗有了不同的看法。