油滴結合的蛋白質TIP47調控C型肝炎病毒RNA複製藉由與病毒的NS5A蛋白質相互作用

Vogt DA, Camus G, Herker E, Webster BR, Tsou CL, Greene WC, Yen TS, & Ott M. Lipid droplet-binding protein TIP47 regulates hepatitis C virus RNA replication through interaction with the viral NS5A protein. PLoS Pathog. (2013) 4:e1003302.

報告者：歐懿丹              時間：13:10~14:00, Oct. 9, 2013

講評老師：蔡佩珍 教授             地點：Room 601

摘要：

C型肝炎病毒是單股核醣核酸病毒，由三個結構蛋白質與八個非結構蛋白質所組成；當C型肝炎病毒感染細胞時，非結構蛋白質NS5A在內質網調控C型肝炎病毒的複製，在油滴位置幫助病毒的組成(1)。此外，非結構蛋白質NS5A的N端a螺旋被認為是調控形成C型肝炎病毒複製複合體的角色(2)。然而，並沒有任何宿主蛋白質被發現與NS5A的N端a螺旋有交互作用。所以在此篇研究，作者使用酵母菌雙雜合系統，找到一個宿主蛋白質為Tail-Interacting Protein 47 (TIP47)會與非結構蛋白質NS5A的N端a螺旋有交互作用。為了知道TIP47在C型肝炎病毒感染有什麼角色，作者剔除TIP47基因在Huh7.5 細胞並且轉染C型肝炎病毒的複製子。作者發現到沒有TIP47表現的細胞，細胞群落形成降低，並且過度表現細胞在缺乏TIP47基因的細胞，可以部分回復C型肝炎的感染。NS5A點突變在九號位置(W9A)會完全失去與TIP47的交互作用並且完全抑制了C型肝炎病毒的複製。而如果結合第二個位置的點突變(I12V)可以去些許回復C型肝炎的複製，代表著第12個位置的點突變可以去克服複製的缺失。由膜懸浮分析試驗顯示，TIP47與C型肝炎複製複合體同在油滴以及在內質網/內含體位置。並且以免疫螢光染色，也發現TIP47與NS5A會出現在油滴位置。所以，C型肝炎的複製與病毒的組成需要NS5A與TIP47的交互作用。

在C型肝炎感染的細胞，TIP47 會與NS5A有交互作用幫助病毒複製及其組成。

參考資料：

1.    Macdonald A, and Harris M. (2004) Hepatitis C virus NS5A: tales of a promiscuous protein. J Gen Virol. 85, 2485-2502.

2.    Penin F, Brass V, Appel N, Ramboarina S, Montserret R, Ficheux D, Blum HE, Bartenschlager R, and Moradpour D. (2004) Structure and function of the membrane anchor domain of hepatitis C virus nonstructural protein 5A. J Biol Chem. 279, 40835-40843.